Κίτ δοκιμής ELISA για κολιστίνη Υψηλή αναπαραγωγικότητα Υψηλή ευαισθησία

Σε γενικές γραμμές, τα δείγματα θα πρέπει να φυλάσσονται σε ψυγείο σε θερμοκρασία 2-4°C για 1-2 ημέρες κατ' ανώτατο όριο.

Τα κατεψυγμένα δείγματα μπορούν να αποψυγούνται σε θερμοκρασία δωματίου (20 25 °C).ΕπικεφαλήςC / 68 77ΕπικεφαλήςΦ) ή σε ψυγείο πριν από τη χρήση.

1Προετοιμασία του 1X Colistin Extraction Buffer I:

Αναμείξτε 1 όγκο 10X Colistin Extraction Buffer I με 9 όγκους αποσταγμένου νερού.

2Προετοιμασία του 1X Colistin Extraction Buffer II για την εκχύλιση κρέατοςΑναμειγνύεται 1 όγκος 6X Colistin Extraction Buffer II με 5 όγκους αποσταγμένου νερού.

3Προετοιμασία 3X Colistin Extraction Buffer II για την εξαγωγή ζωοτροφών και γαρίδαςΑναμείξτε 3 όγκους 6X Colistin Extraction Buffer II με 3 όγκους αποσταγμένου νερού.

Κρέας(αγελάδες, χοιρινό και κοτόπουλο)

1- αφαιρείται το λίπος από το κρέας, ομογενοποιείται μια εύλογη ποσότητα δείγματος με κατάλληλο μίγμα.

2. Ζυγίζει 1 g του ομογενοποιημένου δείγματος κρέατος, προσθέτει 3,5 ml 1X Colistin Extraction Buffer I και 500 ml 1X Colistin Extraction Buffer II, προσθέτει 3 ml στρογγυλοειδούς n-εξανού ή ανακινεί για 3 λεπτά.

3. Κεντρίφωση για 10 λεπτά σε 4.000 x g σε θερμοκρασία δωματίου (20 25ΕπικεφαλήςC / 68 77ΕπικεφαλήςΦ) 4. Αναπνέεται και απορρίπτεται το στρώμα n-εξανού, στη συνέχεια μεταφέρεται 500 I.L. υπερεπιβατικού σε νέο σωλήνα που περιέχει 200 I.L. 10X Colistin Extraction Buffer.200 λίτρα 100% αιθανόλης και 100 λίτρα Colistin Balance Buffer.

5Στροβιλίστε ή κουνηθείτε για 30 δευτερόλεπτα με τη μέγιστη ταχύτητα.

6Χρησιμοποιήστε 75 IU ανά πηγή στην δοκιμή ELISA.

Σημείωση: Συντελεστής αραίωσης:10 Σκόνη κρέατος

1Ομογενοποίηση εύλογης ποσότητας δείγματος με κατάλληλο μείκτη.

2. Ζυγίζει 0,5 g του ομογενοποιημένου δείγματος, προσθέτει 3,5 ml 1X Colistin Extraction Buffer I και 500 ml 1X Colistin Extraction Buffer II, προσθέτει 3 ml στρογγυλοειδούς n-εξανού ή ανακινεί για 3 λεπτά.ΕπικεφαλήςΠΡΟΠΡΑΣΤΗΜΑ ΤΗΣ ΠΡΟΠΡΑΣΤΗΜΑΣ

N3. Κεντρίφωση για 10 λεπτά σε 4.000 x g σε θερμοκρασία δωματίου (20 25ΕπικεφαλήςC / 68 77ΕπικεφαλήςF).

4- Αναπνεύστε και απορρίψτε το στρώμα n-εξανού, στη συνέχεια μεταφέρετε 500 I.L. υπερυψωτικού σε ένα νέο σωλήνα που περιέχει 200 I.L. 10X Colistin Extraction Buffer,200 λίτρα 100% αιθανόλης και 100 λίτρα Colistin Balance Buffer.

5Στροβιλίστε ή κουνηθείτε για 30 δευτερόλεπτα με τη μέγιστη ταχύτητα.

6Χρησιμοποιήστε 75 IU ανά πηγή στην δοκιμή ELISA.

Σημείωση: Συντελεστής αραίωσης: 16.

1Ομογενοποίηση εύλογης ποσότητας δείγματος με κατάλληλο μείκτη.

2Βάζουμε σε ζύγισμα 0,5 g του ομογενοποιημένου δείγματος, προσθέτουμε 2 ml HCl 0,1 M και 2 ml n-hexane και αναμειγνύουμε με στρογγυλοποίηση με υψηλή ταχύτητα για 3 λεπτά.

3. Κεντρίφωση για 10 λεπτά σε 4.000 x g σε θερμοκρασία δωματίου (20 25ΕπικεφαλήςC / 68 77ΕπικεφαλήςΦ). 4. Αναπνεύστε και απορρίψτε το στρώμα n-εξανού, στη συνέχεια, μεταφέρετε 200uL του υπερεπιβαλλόμενου σε ένα καθαρό σωλήνα φυγοκέντρωσης, προσθέστε 150uL του 1×Το Colistin Extraction Buffer I, και ανακινείται με υψηλή ταχύτητα για 30 δευτερόλεπτα.

5Χρησιμοποιήστε 75 IU ανά πηγή στην δοκιμή ELISA.

Σημείωση: Συντελεστής αραίωσης:8.75 Ψάρια/Κραβίδες

1Ομογενοποίηση εύλογης ποσότητας δείγματος με κατάλληλο μείκτη.

2. Ζυγίζει 1,0 g του ομογενοποιημένου δείγματος κρέατος, προσθέτει 3,5 ml 1X Colistin Extraction Buffer I και 500 ml 3X Colistin Extraction Buffer II, προσθέτει 3 ml στρογγυλής n-εξανού ή ανακινεί για 3 λεπτά.

3. Κεντρίφωση για 10 λεπτά σε 4.000 x g σε θερμοκρασία δωματίου (20 25ΕπικεφαλήςC / 68 77ΕπικεφαλήςΦ) 4. Αναπνέουμε και απορρίπτουμε το στρώμα n-εξάνης, μεταφέροντας κατόπιν 200 ΙΛ υπερυψωτικού σε νέο σωλήνα που περιέχει 300ΙΛ αποσταγμένο νερό, 200ΙΛ 10X Colistin Extraction Buffer,200 λίτρα 100% αιθανόλης και 100 λίτρα Colistin Balance Buffer.

5Στροβιλίστε ή κουνηθείτε για 30 δευτερόλεπτα με τη μέγιστη ταχύτητα.

6Χρησιμοποιήστε 75 IU ανά πηγή στην δοκιμή ELISA.

Σημείωση: Συντελεστής αραίωσης:25