Τετραδοτοξίνη TTX ELISA υψηλής ευαισθησίας

Προετοιμασία αντιδραστηρίου

• Διαλύτης εκχύλισης

Η σύνθεση του διαλύτη εκχύλισης είναι η ακόλουθη: μεθανόλη:σταγμένο νερό: παγετώδες οξικό οξύ=400:599:1Για παράδειγμα, μεθανόλη 40 ml+σταφισμένο νερό 59,9 ml+παγετώδες οξικό οξύ 0,1 ml

• 1×διαλύτης δειγματοληψίας

Αναμειγνύεται 1 όγκος 4 × αραιωτικού δείγματος με 3 όγκους αποσταγμένου νερού.

Αρκουδάκι(μύες,ήπατος,δέρμα)

• Ομογενοποιείται εύλογη ποσότητα δείγματος με κατάλληλο αναμεικτικά.
• Ζυγίζει 2g του δείγματος ομογενοποίησης σε κατάλληλο φιαλίδιο και αναμειγνύεται καλά με 10 ml διαλύτη εκχύλισης.
• Κρατήστε το φιαλίδιο σε νερό 90°C για 10 λεπτά και κατά τη διάρκεια αυτής της διαδικασίας κουνήστε το φιαλίδιο 3 φορές.
• Το φιαλίδιο ξεπλένεται για 1 λεπτό με νερό της βρύσης για να κρυώσει το δείγμα και στη συνέχεια προστίθεται 1 ml εξάνου, στροβιλιά για 30 δευτερόλεπτα.
• Το δείγμα φυγοκεντρώνεται σε θερμοκρασία 4.000 g επί 5 λεπτά, πιπτίζονται 100 μl υγρού μεταξύ των στρωμάτων και προστίθενται 300 μl αραιωτικού 1 x δείγματος.
• Χρησιμοποιείται 50μL του διαλύματος δείγματος ανά πηγάδι για την ανάλυση.

Σημείωση:Παράγοντας αραίωσης:20